本实验项目包括生物安全知识和2019新型冠状病毒病毒的分离培养及鉴定两个部分。通过此项目需要了解病原微生物的危害等级及相应的生物安全等级实验室。在此基础上,通过本项目掌握病毒的分离,培养及鉴定的一般性方法。病毒是非细胞型微生物,需要在活细胞内复制。因此病毒培养需要特定细胞株(细胞上要有相应受体)。气道上皮细胞表面具有新冠病毒的受体,是其培养的适宜细胞。病毒的鉴定主要通过其成分(核酸或蛋白质)。2019新冠病毒早期主要通过核酸鉴定。实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定核酸序列进行定量分析的方法。Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。在Real-timePCR加入特定基因探针可检测特定基因。